Normalna ludzka skóra właściwa zawiera wyraźne populacje komórek dendrytycznych CD11c + BDCA-1 + i makrofagów CD163 + FXIIIA + ad

Użyliśmy przeciwciał owczych oczyszczonych powinowactwem do FXIIIA do wszystkich naszych badań immunofluorescencji podwójnie znakowanych, ponieważ stwierdziliśmy, że daje najlepsze wybarwienie. Występowała prawie całkowita koekspresja owczego przeciwciała FXIIIA i powszechnie stosowanego mysiego monoklonalnego (klon AC-1A1), podczas gdy inne mysie przeciwciała monoklonalne przeciwko FXIIIA wytwarzały słabsze i mniej stałe barwienie (dane nie pokazane). Dane te wskazują, że 2 powszechnie stosowane markery dla skórnych DC są w rzeczywistości wyrażane przez porównywalnie obfite, ale różne populacje. Rysunek 1FXIIIA + i komórki CD11c + są wyjątkowymi populacjami skórnymi. (A) Immunohistochemia na normalnej skórze człowieka z użyciem przeciwciał FXIIIA (lewy panel) i CD11c (prawy panel) (n = 15). Komórki FXIIIA + rozprzestrzeniały się w skórze właściwej, podczas gdy komórki CD11c + były zlokalizowane głównie w powierzchniowej skórze właściwej. (B) Liczba komórek CD11c + i FXIIIA + na mm w normalnej skórze właściwej była podobna. Paski błędów wskazują SEM. (C) FXIIIA i CD11c zidentyfikowały 2 odrębne populacje. Białe linie oznaczają połączenie dermo-naskórkowe. Pręty skali: 100 .m. Populacje FXIIIA + i CD11c + nie są komórkami LC ani plazmocytoidowymi DC. Aby dodatkowo scharakteryzować te 2 populacje komórek skórnych, najpierw oceniano ekspresję markerów używanych do identyfikacji LC i / lub plazmacytoidowych DC (PDC), każdy zastosowany w połączeniu z przeciwciałami przeciwko FXIIIA lub CD11c. Ani FXIIIA, ani CD11c nie były kolokalizowane z markerami LC CD1a (Figura 2, A i B) i Langerin (Suplementowa Figura 1, A i B, materiał uzupełniający dostępny online z tym artykułem; doi: 10.1172 / JCI32282DS1), ani markery PDC CD123 ( Figura 2, C i D) i BDCA-2 (dodatkowa Figura 1, C i D). Dlatego też komórki FXIIIA + i CD11c + różnią się od dodatkowych populacji LC i PDC w normalnej skórze. Tabela podsumowuje ekspresję różnych markerów leukocytów w komórkach FXIIIA + i CD11c +. Ryciny 2FXIIIA + i CD11c + nie są LC ani plazmocytoidowymi DC. Ani FXIIIA, ani CD11c nie wykazywały koekspresji z antygenem Langerhansa CD1a (A i B) lub antygenem plazmacytoidowym CD123 (C i D). Pasek skali: 100 mm. Tabela Charakteryzacja komórek CD11c + i FXIIIA + w normalnej ludzkiej skórze właściwej komórki CD11c + koeksprymują marker DC krwi BDCA-1, a niewielka frakcja również ekspresjonuje zależną od DC lizosomalną . glikoproteinę / CD208 i DEC-205 / CD205. BDCA-1 oznacza również populację CD11c + szpikowych DC w krwi i odnotowaliśmy również koekspresję tych 2 markerów w skórze właściwej (Figura 3, A i B). Dwa inne markery, które ulegają ekspresji w tkankach DC, to lizosomalny marker związany z DC-lizosomalnie związany z błoną glikoproteiny / CD208 (DC-LAMP / CD208) i receptor endocytowy DEC-205 / CD205. Niewielka część komórek CD11c + wyrażała te 2 markery (Figura 3, C = F). Frakcja komórek CD11c + DC-LAMP + była jakościowo mniejsza niż frakcja komórek CD11c + DEC-205 +. DC-LAMP / CD208 ulega ekspresji podczas dojrzewania DC i zauważyliśmy, że komórki pozytywne dla tego markera często były w agregatach skórnych z innymi CD11c + DC-LAMP. komórki. Wyniki te wskazują, że komórki CD11c + w skórze właściwej cechują się obecnością szpikowych DC w krwi, ale niektóre z nich są w bardziej dojrzałym stanie różnicowania (11). Figura 3CD11c + komórki są definiowane przez BDCA-1, DC-LAMP / CD208 i DEC-205 / CD205. FXIIIA nie pokrywały się z BDCA-1 (A), DC-LAMP / CD208 (C) lub DEC-205 / CD205 (E). Większość komórek CD11c + koeksprymowała BDCA-1 (B). Małe podzbiory komórek CD11c + koeksprymowały DC-LAMP / CD208 (D) i DEC-205 / CD205 (F). Pasek skali: 100 .m. Komórki FXIIIA + eksprymują znacznik makrofagowy i receptor zmiatacza CD163. CD163, receptor zmiatający kompleks hemoglobiny / haptoglobiny, identyfikuje makrofagi obecne w tkankach i był to jedyny badany przez nas marker, który był jednolicie koekspresjonowany przez komórki FXIIIA +, a nie przez komórki CD11c + (Figura 4, A i B). Kilka innych markerów eksprymowano na części komórek FXIIIA + i CD11c +. Obejmowały one receptory makrofagów receptora mannozowego / CD206 (MMR / CD206, Figura 4, C i D), specyficzną dla DC integrynę nieintegrowaną / CD209 (DC-SIGN / CD209, Figura 4, E i F), CD45 i HLA-DR (Figura 5). W normalnej skórze zarówno MMR / CD206, jak i DC-SIGN / CD209 były obfitsze w makrofagi (komórki FXIIIA +) niż DC (komórki CD11c +), co jest zgodne z ostatnimi badaniami w stanie zapalnym skóry i węzłów chłonnych (11, 12). Odwrotnie, CD45 i HLA-DR były bardziej obfite w CD11c + niż w komórkach FXIIIA +. Wszystkie te obserwacje są zgodne z interpretacją, że komórki CD11c + w skórze właściwej są częścią szlaku DC różnicowania, podczas gdy komórki FXIIIA + są bardziej podobne do makrofagów. Figura 4 Marker makrofagów CD163 definiuje komórki FXIIIA +. Komórki FXIIIA ulegały ekspresji znacznika makrofagowego CD163 (A), a podzbiór nakładał się z MMR / CD206 (C) i DC-SIGN / CD209 (E)
[więcej w: młody jęczmień w proszku, gregor laubsch, maciej zagłoba zygler ]
[podobne: śliwka w czekoladzie kalorie, trojanek, jacek rybacki ]