Receptor 1 hormonu koncentrującego melaninę, nowy cel odpowiedzi autoprzeciwciał w bielactwie ad 6

Przeciwnie, na wiązanie Ab do receptora nie miała wpływu preinkubacja próbek z bielactwa nabłonka z błonami komórkowymi CHO: nie było znaczącej różnicy między indeksami Ab (Figura 4) mierzonymi z i bez preinkubacji (P = 0,949). Wyniki sugerują, że reaktywność Ab w surowicy pacjenta z bielactwem była specyficznie absorbowana przez ekspresję MCHR1 w błonach komórkowych CHO. Rysunek 4 Eksperymenty adsorpcji. Surowice surowice MCHR1 Ab-dodatnie (n = 3) i pula zdrowych surowic kontrolnych (n = 6) wstępnie przedsorbowano membranami komórkowymi CHO lub CHO-MCHR1 przed analizą w badaniu radiobiałania. Wyniki dwóch eksperymentów przedstawiono jako średni indeks Ab i SD. Pula surowic kontrolnych (próbka 1) i surowica od pacjentów z bielaczem dodatnim MCHR1 (próbki 2. 4), każda bez preinkubacji (czarne słupki), z preinkubacją z błonami komórek CHO (białe słupki) i z preinkubacją z komórką CHO-MCHR1 membrany (szare paski). Testy wiązania MCHR1. Wpływ IgG od pacjentów z bielactwem dodatnim na MCHR1 (n = 6) i zdrowych kontrolnych (n = 6) po związaniu MCH z receptorem analizowano w testach wiązania MCHR1. Średni procent zahamowania plus lub minus SD wiązania MCH dla bielactwa i kontrolnych grup IgG wynosił 45%. 4% i 16%. 14%, odpowiednio (rys. 5). IgG od pacjentów z bielactwem dodatnim od MCHR1 istotnie hamowało wiązanie MCH w porównaniu z próbkami IgG od osobników kontrolnych (p = 0,001). Figura 5 Testy wiązania MCHR1. Błony komórkowe CHO-MCHR1 inkubowano wstępnie z IgG od pacjentów bielactwa nabytego (n = 6) lub kontrolnych (n = 6) przed wiązaniem [125I] -MCH mierzono w testach wiązania MCHR1. Średni procent hamowania i SD wiązania [125I] -MCH pokazano dla MCHR1 Ab-dodatniego bielactwa IgG (biały słupek) i kontrolnych próbek IgG (czarny słupek). IgG od pacjentów z bielactwem dodatnim od MCHR1 istotnie hamowało wiązanie MCH w porównaniu z próbkami IgG od osobników kontrolnych (p = 0,001). Analiza pacjentów z bielactwem dodatnim dla MCHR1. Szczegóły dotyczące pacjentów z bielactwem M-dodatnim Ab-dodatnim i Ab-ujemnym porównano w Tabeli 1. Nie stwierdzono związku między obecnością przeciwciał przeciwko MCHR1 i wiekiem pacjenta w czasie pobierania próbek surowicy, wiek pacjenta. w momencie wystąpienia choroby, czasu trwania choroby lub płci pacjentów. Ponadto, kliniczny podtyp bielactwa nie wydawał się być związany z występowaniem receptorów Abs, a trzech pacjentów, którzy mieli aktywny bielactwo było ujemnych pod względem przeciwciał przeciwko MCHR1. Ponadto obecność zaburzeń autoimmunologicznych nie korelowała z reaktywnością MCHR1B. Wśród pacjentów z bielactwem dodatnim dla MCHR1 Ab, tylko jeden na dziewiątych był dodatni pod względem Abs do tyrozynazy, TRP-1, TRP-2 i Pmel17, a jeden miał reaktywność Ab względem samego Pmel17. Żadne nie było dodatnie dla Ab do SOX10 (Tabela 2). Tabela Porównanie pacjentów z bielactwem bielactwa MCHR1 z Ab-dodatnim i Ab-ujemnym Tabela 2 Przypadki obecności przeciwciał anty-elanocytowych u pacjentów z MCHR1-dodatnim Ab Dane podłużne dotyczące trwałości reaktywności MCHR1-Ab były dostępne tylko dla czterech pacjentów z bielactwem . W przypadku jednego pacjenta, przeciwciała MCHR1 mogą nadal być wykrywane w próbce surowicy pobranej 12 miesięcy po próbce, która została wstępnie zbadana. W przypadku pozostałych trzech pacjentów, receptory Aby można było wykazać w surowicach pobranych odpowiednio po 5, 6 i 8 miesiącach, po próbce, która była analizowana na początku badania. Omówienie Wykorzystując technologię prezentacji fagowej z biblioteką fagową cDNA melanocytów, zidentyfikowaliśmy MCHR1 jako nowy cel reaktywności autoprzeciwciał u pacjentów z bielactwem. CDNA MCHR1 odzyskano po trzeciej rundzie biopanningu wobec biblioteki fagowej cDNA cDNA melanocytów z pulą bielactwa IgG od dziesięciu pacjentów. Testy radiobinding z użyciem oznaczonego [35S] MCHR1 zostały następnie użyte do potwierdzenia immunoreaktywności wobec receptora w surowicy od pacjentów z bielactwem. Spośród 55 analizowanych surowic bielaczych, przeciwciała Ab. Do receptora wykryto w 16,4%, podczas gdy surowice AD, GD, SLE i kontrolne nie wykazywały żadnej reaktywności, co wskazuje na wysoką swoistość związaną z chorobą. Glikozylacja receptora nie zmieniała indeksu wiązania Ab żadnej testowanej surowicy pacjentów bielactwa, co sugeruje, że żaden epitop MCHR1 rozpoznawany przez surowice surowice Ab nie był zmieniony przez glikozylację białka. Co więcej, odkrycie to wykazało, że surowice pacjentów cierpiących na bielactwo nie wykazują obecności glikozylowanych epitopów lub epitopów, które mogą ulec zmianie w wyniku posttranslacyjnej obróbki receptora. Podobne wyniki zostały udokumentowane dla tyreoglobuliny autoantygenów i peroksydazy tarczycowej, ponieważ deglikozylacja tych cząsteczek nie miała wpływu na wiązanie autoprzeciwciał (27).
[patrz też: młody jęczmień w proszku, brwi makijaż permanentny, pogotowie stomatologiczne kielce ]
[podobne: artur szudrowicz, joanna derybowska, maciej zagłoba zygler ]