Ścieżka MEKK1-JNK odgrywa rolę ochronną w przeciążeniu ciśnieniowym, ale nie pośredniczy w przeroście mięśnia sercowego czesc 4

Podwójne próbki poddano analizie immunoblot z użyciem przeciwciała anty-JNK1. W b, średnia z fosfo-p46-JNKs / całkowitego JNK1 u myszy kontrolnych z pozorowaną operacją jest wyrażana jako w każdej grupie. * P <0,05, ** P <0,001 w porównaniu do kontroli pozornej w każdej grupie. (c) Zwierzęta uśmiercano w 7 dni. Aktywność ERK i p38-MAPK oceniano przez immunoblotting z przeciwciałem anty-fosfospecyficznym. Filtry reprofowano przeciwciałem anty-nie fosfospecyficznym po odpędzeniu. Wyniki były reprezentatywne dla pięciu próbek na grupę. Zbadaliśmy, w jaki sposób przeciążenie ciśnieniem w naszym modelu wpływa na innych członków rodziny MAPK. U myszy kontrolnych przeciążenie ciśnieniem przez 7 dni powodowało znaczące wzrosty zarówno fosfo-ERK, jak i fosfo-p38-MAPK w porównaniu z myszami operowanymi pozornie (Figura 1c). W MEKK1. /. myszy, poziom fosfo-ERK i fosfo-p38-MAPK u myszy operowanych pozornie był podobny do tego u myszy kontrolnych, a przeciążenie ciśnieniem powodowało porównywalne poziomy wzrostu zarówno fosfo-ERKs jak i fosfo-p38-MAPK w porównaniu z tymi we kontrolne myszy (Figura 1c). Przeciążenie ciśnieniowe powoduje znaczny poziom przerostu mięśnia sercowego w MEKK1. /. myszy. Zbadaliśmy, czy MEKK1. /. Ma wpływ na hipertrofię wywołaną przeciążeniem ciśnieniowym. myszy. Ani ciężar ciała, ani waga serca nie różniły się istotnie pomiędzy kontrolą a MEKK1. /. myszy przed bandowaniem (dane nie pokazane). Sugeruje to, że MEKK1 nie odgrywa istotnej roli w rozwoju serca, w przeciwieństwie do MEKK3, który odgrywa kluczową rolę w rozwoju sercowo-naczyniowym (28). Po 7 i 14 dniach tworzenia prążków indukowany gradient ciśnienia był podobny w MEKK1. /. i kontrolne myszy (Figura 2a i dane nie pokazane). Zgodnie z oczekiwaniami, u myszy kontrolnych, pasy aorty w ciągu 7 lub 14 dni znacznie zwiększały masę LV / masę ciała (LVW / BW). W MEKK1. /. myszy, opaska aorty powodowała znaczny wzrost LVW / BW po 7 i 14 dniach (Figura 2b). Wartość LVW / BW po 14 dniach w MEKK1. /. myszy były nawet wyższe niż u myszy kontrolnych. Przerost serca ze względu na bandaż aorty w MEKK1. /. u myszy potwierdzono również LVW / długość piszczeli, kolejny wskaźnik przerostu serca, który mierzono po 7 dniach (Figura 2c). Obszar przekroju poprzecznego miocytów sercowych był znacznie zwiększony po bandowaniu zarówno w kontroli, jak i MEKK1 (3). myszy i nie było znaczącej różnicy w przekroju miocytów między kontrolą a MEKK1. /. myszy po 7 dniach pasażu aorty (Figura 2d). Ryc. 2 Przerost serca w wyniku przeciążenia ciśnieniem jest zachowany w MEKK1. /. myszy. Poprzeczne pasmo aorty lub operację pozorną zastosowano w kontrolnej lub MEKK1. /. myszy. (a) Gradient ciśnienia w przewężeniu poprzecznej aorty mierzono po 7 dniach. (b) Masę LV (LVW) (mg) / masę ciała (BW) (g) uzyskano po 7 i 14 dniach. * P <0,001 vs. myszy MEKK1 + / + z 14-dniowym pasemkiem. (c) LVW (mg) / długość piszczeli (TL) (mm) uzyskano po 7 dniach. n = 5. 10. (d) Pole przekroju serca miocytów uzyskano po 7 dniach. n = 5 dla każdej grupy. Prawy panel pokazuje mikrografie świetlne skrawanych srebrem fragmentów 1-. M miokardium LV z pozorowanej i opasującej MEKK1. /. myszy. (e) Ekspresję mRNA przedsionkowego czynnika natriuretycznego (ANF) po 7 dniach oceniano za pomocą analizy Northern blot. Przeprowadzono analizy densytometryczne. Średnie ANF / GAPDH u myszy kontrolnych poddanych tydzień pasmowania wyrażono jako 1. n = 5 dla każdej grupy. NS, nieistotne. Ekspresję mRNA przedsionkowego czynnika natriuretycznego (ANF), genu typu płodowego często regulowanego w górę w wielu rodzajach przerostu serca (26), określono za pomocą analizy Northern blot. Ekspresja ANF była regulowana w górę przez pasowanie aorty przez 7 dni zarówno w kontroli, jak i MEKK1 (3). myszy. Chociaż ekspresja ANF po bandowaniu była zwykle wyższa w MEKK1. /. myszy, nie było statystycznie istotnej różnicy w poziomie ekspresji ANF między tymi dwiema grupami (Figura 2e). Podsumowując, hipertrofia serca rozwija się w odpowiedzi na przeciążenie ciśnieniowe w MEKK1. /. myszy. Przeciążenie ciśnieniowe powoduje zwiększoną śmiertelność i zastoinową niewydolność serca w MEKK1. /. myszy. Chociaż przeciążenie ciśnieniem powodowało znaczny poziom przerostu serca zarówno w kontroli, jak i MEKK1. /. myszy, MEKK1. /. myszy wykazywały wyższą śmiertelność w ciągu 14 dni po opaskowaniu aorty. Podczas gdy żadna z 18 myszy kontrolnych nie zmarła w ciągu 2 tygodni po bandowaniu, 4 z 16 MEKK1. /. myszy zmarły między 7 a 14 dniem. U myszy kontrolnych, masa płuc / ciała 14-dniowej grupy aortalnej nie różniła się istotnie od grupy pozorowanej. Natomiast w MEKK1. /. myszy, masa płuc / ciała w 14-dniowej grupie aortalnej była znacznie wyższa niż w grupie pozorowanej (ryc. 3a) [podobne: termometr microlife instrukcja obsługi, śliwka w czekoladzie kalorie, przechowywanie kosmetyków ] [przypisy: młody jęczmień w proszku, śliwka w czekoladzie kalorie, trojanek ]