Systemowo wyprowadzone komórki jelita grubego CD4 + Th2 odgrywają centralną rolę w alergicznej biegunki z udziałem STAT6

Systemalnie zagruntowane myszy BALB / c rozwinęły ciężką biegunkę po wielokrotnym doustnym podaniu owoalbuminy (OVA). Analiza histologiczna wykazała, że dramatyczny naciek eozynofilów i komórek tucznych wystąpił w jelicie grubym, ale nie w jelicie cienkim myszy z biegunką. Co ciekawe, CD4 + Limfocyty T jelita grubego wydzielały IL-4 i IL-13 na wysokich poziomach. Identycznie leczone myszy z uszkodzonym genem STAT6 nie rozwinęły wywołanej OVA biegunki. Ponadto, leczenie myszy BALB / c monoklonalnym przeciwciałem anty-IL-4 zapobiegało rozwojowi alergicznej biegunki. Badanie transferu adoptywnego wykazało, że układowo zagruntowane splenne komórki T CD4 + preferencyjnie rekrutowano do jelita grubego po ekspozycji na doustną OVA. Wyniki te zdecydowanie sugerują, że systemowo otrzymywany CD4 +. Komórki T jelita grubego odgrywają kluczową rolę w powstawaniu zaburzeń alergicznych jelita za pośrednictwem Th2 poprzez transdukcję sygnału STAT6. Wprowadzenie Biegunka, jeden z alergicznych objawów jelitowych wywołanych przez spożywane alergeny pokarmowe, charakteryzuje się zaburzoną wymianą jonów, nadmierną produkcją śluzu i wysokim poziomem przeciwciał IgE w surowicy (Ab., 1, 2). W rzeczywistości ustalono kilka modeli zwierzęcych w celu zbadania mechanizmu leżącego u podstaw nadwrażliwości jelitowej, takiej jak biegunka (3). Obejmują one mysie modele, w których białko Ag było podawane pozajelitowo z adiuwantami, takimi jak kompleksy immunostymulujące, wodorotlenek glinu i toksyna cholery, w celu wytworzenia odpowiedzi immunologicznej o wysokiej IgE (4. 6). Ponadto, opracowano model anafilaktycznego mysiego jelita, w którym pośredniczy IgE, poprzez podskórną implantację mysiej hybrydomy zdolnej do wytwarzania monoklonalnego anty-TNP IgE Ab (7). Chociaż opracowano tak różne mysie modele nadwrażliwości, należy wyjaśnić leżący u podstaw mechanizm alergicznych reakcji jelitowych. W niniejszym badaniu opracowaliśmy nowy model eksperymentalny, w którym wielokrotne doustne prowokowanie za pomocą OVA u systemowo zagruntowanych myszy BALB / cz Ag w CFA prowadzi do ciężkiej biegunki. Następnie zastosowaliśmy ten mysi model biegunki, aby wyjaśnić podstawowy mechanizm nadwrażliwości jelita. Przetworniki sygnałowe i aktywatory transkrypcji (STAT) 6 są niezbędne do indukcji IL-4. i odpowiedzi zależne od IL-13a, takie jak przełączanie klas na IgE, jak również indukcja komórek typu Th2 (8. 10). W tym względzie ostatnie badania ujawniły, że myszy z niedoborem STAT6 są chronione przed nadwrażliwością dróg oddechowych wywołaną OVA wynikającą z niskiego poziomu surowiczego IgE, nacieku eozynofilowego i zapalenia okołonaczyniowego (11, 12). Chociaż szlak sygnałowy, w którym pośredniczy STAT6, jest związany z indukcją nadreaktywności dróg oddechowych, wciąż nie wiadomo, czy ta kaskada sygnalizacyjna STAT6 odgrywa kluczową rolę w rozwoju alergicznych reakcji jelitowych, takich jak indukowane przez żywność Ag (np. OVA -indukowana) biegunka. Nasze obecne dane demonstrują centralną rolę systemowo powstałej IL-4. oraz komórki Th2 wytwarzające IL-13. i sygnał z udziałem STAT6 w rozwoju miejscowych reakcji alergicznych w dużym, ale nie małym jelitu. Ponadto, nasz model mysiej biegunki dostarcza unikalnego eksperymentalnego narzędzia do badania leżącego u podstaw mechanizmu molekularnego i komórkowego zaburzeń alergicznych w jelicie. Metody Myszy. Myszy BALB / c, C57BL / 6, SJL / J i C3H / HeJ i myszy SCID z tłem BALB / c zakupiono od firmy Japan Clea Co. (Tokio, Japonia). Myszy z uszkodzonym genem STAT6 (STAT6 A / y) zakupiono w The Jackson Laboratory Animal Resources Center (Bar Harbor, Maine, USA). Transgeniczne myszy eksprymujące zielone białko fluorescencyjne (myszy GFP Tg) zostały dostarczone przez M. Okabe z Instytutu Badawczego ds. Chorób Mikrobiologicznych na Uniwersytecie w Osace (13). Biorąc pod uwagę, że tłem myszy GFP Tg były BCF1 x BCF1, wielokrotnie krzyżowano krzyżowo myszy te myszy BALB / c, aby ustalić myszy GFP Tg z tłem BALB / c. Wszystkie myszy przebywały w eksperymentalnym ośrodku dla zwierząt w Instytucie Badawczym ds. Chorób Mikrobiologicznych na Uniwersytecie w Osace i otrzymywały wyjałowioną żywność (certyfikowana dieta MF, Oriental Yeast Co., Osaka, Japonia) i autoklawizowaną wodę z kranu ad libitum. Wszystkie myszy miały 5. 6 tygodni na początku indywidualnych eksperymentów. Wyzwanie antygenowe. Myszy były szczepione układowo albo raz albo dwa razy mg OVA (frakcja V, Sigma Chemical Co., St. Louis, Missouri, USA) w 100 .l CFA (DIFCO Laboratories, Detroit, Michigan, USA). Tydzień po systemowym szczepieniu myszy wielokrotnie podawano 1, 10, 50 lub 100 mg OVA rozpuszczonego w 300 ul PBS przez intubację żołądka trzy razy w tygodniu.
[więcej w: gregor laubsch, olej z konopii indyjskiej, maciej syka ]
[więcej w: szczepionki na pneumokoki, benzoesan sodu szkodliwość, paznokcie w dwóch kolorach ]