Wysoka częstość występowania białaczki u dużych zwierząt po terapii genowej komórek macierzystych za pomocą wektora retrowirusowego wyrażającego HOXB4

Terapia genowa HSC za pośrednictwem retrowirusa jest stosowana w leczeniu osób z wieloma chorobami zagrażającymi życiu. Jednakże niektórzy pacjenci z SCID-X1 rozwinęli białaczkę pośredniczoną przez retrowirusy po leczeniu. Selektywna korzyść wzrostu komórek zmodyfikowanych genowo u pacjentów z SCID-X1 sugeruje, że transgen mógł odgrywać rolę w leukemogenezie. Zgłaszamy tutaj, że 2 z 2 psów i z 2 makaków rozwinęło białaczkę mieloidalną około 2 lata po przeszczepieniu komórkami, które nadeksprymowały homeoboks B4 (HOXB4) i komórki transdukowane kontrolnym wektorem gammaretrowirusowym, który nie wyrażał HOXB4. Komórki białaczkowe rozregulowały ekspresję onkogenów, blok różnicowania szpiku i nadekspresję HOXB4. Knockdown HOXB4 przywrócił różnicowanie w komórkach białaczkowych, co sugeruje udział HOXB4. W przeciwieństwie do tego, białaczka nie powstała z komórek niosących kontrolny wektor gammaretowirusowy. Ponadto, białaczka nie pojawiła się u 5 zwierząt z wysokim poziomem znakowania i długotrwałej poliklonalnej populacji po transplantacji komórkami transdukowanymi identycznym szkieletem wektora gammaretrovirus wyrażającym metylotransferazę metyloguaninową. Odkrycia te, w połączeniu z brakiem białaczki u wielu innych dużych zwierząt przeszczepionych komórkami transdukowanymi wektorami gammaretrowirusa eksprymującymi geny inne niż HOXB4, pokazują, że nadekspresja HOXB4 stwarza znaczące ryzyko leukemogenezy. Nasze dane sugerują zatem ciągłą potrzebę ostrożności przy genetycznej manipulacji w komórkach ponownie zaludniających się, szczególnie gdy transgen może dawać wewnętrzną przewagę wzrostu. Wprowadzenie Terapia genowa jest obiecująca dla zapewnienia nowych sposobów leczenia wielu chorób genetycznych i nabytych (1), a retrowirusy są obecnie najbardziej wydajnymi wektorami dostarczania genów do HSC. Wektory Gammaretroviral wykazały wczesny sukces kliniczny związanej z X SCID (SCID-X1) (2. 5), SCID adenozyny (ADA-SCID) (6. 8) i przewlekłej choroby ziarniniakowej związanej z X (X-CGD) ( 9). Jednak u 4 pacjentów z SCID-X1 rozwinęła się białaczka limfocytów T po przeniesieniu genu IL2R. za pomocą wektora gammaretrovirusowego opartego na MLV do HSCs 2. 3 lata po leczeniu, ale nie w innych badaniach terapii genowej (10, 11). Odkrycia te doprowadziły do stwierdzenia, że białaczka wywołana przez wektory retrowirusowe może być związana z określonymi transgenami. Badania przeprowadzono na modelach myszy w celu rozwiązania problemów bezpieczeństwa związanych z terapią genową komórek macierzystych opartych na wektorze retrowirusowym (12. 14). Jednak odkrycia w modelach mysich mogą nie zawsze jasno przewidywać wyniki w warunkach klinicznych, prawdopodobnie z powodu wewnętrznych różnic między ludźmi a myszami. Ponadto w badaniach klinicznych zwykle stosuje się znacznie wyższe dawki komórek macierzystych, co powoduje wlew znacznie większej liczby zmodyfikowanych genów komórek macierzystych w porównaniu z badaniami na myszach. W związku z tym badania na dużych zwierzętach, takich jak psy i naczelne inne niż ludzie, były bardziej przewidywalne niż badania na myszach. W związku z tym wykorzystaliśmy duże modele zwierzęce do badania transferu genu HSC w celu uwzględnienia bezpieczeństwa HSC modyfikowanych genetycznie. Donoszono, że długoterminowa analiza dużych zwierząt (17 psów i 23 pawianów), które otrzymały komórki zmodyfikowane genem, nie zidentyfikowała nowotworów złośliwych za pośrednictwem wektora (15). Po ponad 40 zwierzętach obserwuje się średni czas 3,1 roku i utrzymują normalną hematopoezę. Zgromadzone dane z badań na myszach sugerują, że nadmierna ekspresja homeoboxu B4 (HOXB4) zwiększa ekspansję HSC in vivo (16, 17) i ex vivo (18, 19). W przeciwieństwie do silnie leukemogennej zdolności innych członków skupisk genów HOX (20), HSCs ekspandowane przez HOXB4 zachowują swoje normalne różnicowanie i długoterminowy potencjał zaludnienia i nie wykryto żadnych zaburzeń hematologicznych w dużych grupach myszy, które zostały przeszczepione HSC z transdukcją HOXB4 (16, 18). Nasze poprzednie badania na gatunkach naczelnych innych niż ludzie pokazały, że nadekspresja HOXB4 znacząco rozszerza komórki repopulacyjne, w szczególności krótkotrwałe komórki repopulacyjne (21). Tutaj scharakteryzowano białaczki, które rozwinęły się u 3 zwierząt, które otrzymały transdukowane HOXB4 komórki CD34 + około 2 lata po transplantacji. Porównaliśmy wyniki z grupą kontrolną zwierząt, które otrzymały transdukowane komórki CD34 + z tym samym szkieletem wektora, ale eksprymujące gen metylotaniny metylotransferazy (MGMT). Wyniki Rozwój białaczki u 3 zwierząt około 2 lata po transplantacji. Zbadaliśmy wpływ nadekspresji HOXB4 w modelach naczelnych i nieludzkich
[przypisy: ciśnieniomierz elektroniczny, maciej syka, olejowanie włosów kręconych ]
[hasła pokrewne: empress, kto poślubi mojego syna uczestnicy, wypadanie płatka zastawki mitralnej ]