Zwiększona ekspresja receptora C5a w sepsie ad 7

Poza płucami, wątrobą, nerkami i sercem badaliśmy także jelito, tarczycę i mózg. W tych ostatnich trzech narządach nie znaleziono dowodów zwiększonej ekspresji mRNA dla C5aR lub wiązania in vivo IgGa5aR IgG (dane nie pokazane) podczas wystąpienia sepsy. Dlatego postanowiliśmy skupić się na zmianach w płucach, wątrobie, nerkach i sercu po CLP. Wykazaliśmy zwiększone wiązanie a C5aR in vivo i towarzyszyło zwiększonej ekspresji mRNA dla C5aR w tych czterech narządach po posocznicy wywołanej przez CLP. Ponadto, barwienie immunohistochemiczne wykazało, że C5aR było podwyższone w komórkach nabłonka oskrzeli i małych naczyniach, hepatocytach, komórkach nabłonka kanalików nerkowych i miocytach w sercu. Niedawno donieśliśmy, że wiązanie C5a z granulocytami obojętnymi krwi u szczurów CLP jest zmniejszone i że aktywność wiązania można znacznie poprawić przez traktowanie C5a (4), co sugeruje rozwój zmniejszonej powierzchni C5aR na neutrofilach szczura podczas sepsy. Dlatego powstaje pytanie, czy C5aR na neutrofilach krwi podczas sepsy może być regulowane inaczej niż to pokazane dla różnych narządów, w których stwierdzono zwiększone wiązanie a C5aR w tym badaniu. Internalizacja C5a. Kompleksy C5aR na powierzchni komórek fagocytujących są dobrze znane. Obecnie badamy zawartość C5aR na neutrofilach podczas sepsy u szczurów. Wstępne dane wskazują na utratę C5aR na neutrofilach krwi po CLP (NC Riedemann i wsp., Dane niepublikowane), co sugeruje, że C5aR na neutrofilach krwi może być regulowane inaczej niż C5aR w narządach stałych podczas sepsy. Nasze dane sugerują, że zarówno białko C5aR, jak i mRNA są podwyższone w narządach podczas sepsy. Dodatkową możliwością jest to, że C5aR, podczas sepsy, ulega zmianie konformacyjnej, co zwiększa jego powinowactwo do przeciwciała, ale nie ma bezpośrednich dowodów na poparcie tej możliwości. Mimo że leczenie przeciwciałami przeciwko C5a znacznie zwiększa przeżywalność sepsy wywoływanej przez CLP u szczurów (1), blokada C5aR za pomocą swoistego przeciwciała nie została wcześniej oceniona w doświadczalnej posocznicy. Wyniki leczenia myszy CLP IgG A5aR wykazały znacznie lepszą przeżywalność, gdy myszom wstrzyknięto. C5aR bezpośrednio po CLP. Opóźniony wlew (do 6 godzin sepsy) A5aR nie spowodował korzystnego wyniku w sepsie, być może z powodu wczesnego wzrostu C5aR w różnych narządach. Nasze wyniki demonstrują dramatyczne efekty traktowania. C5aR na poziomach IL-6 i TNF-a w surowicy. podczas sepsy (Figura 7a) i na zawartość bakterii CFU w różnych narządach (Figura 7b). Dane te sugerują, że blokada C5aR znacznie osłabia odpowiedź cytokinową. Wykazano, że wysokie poziomy IL-6 w surowicy są predyktywne w przypadku słabych wyników u pacjentów z sepsą (31. 33). Wyniki na Figurze 7b również sugerują, że korzystne efekty leczenia A5aR (zredukowane CFU narządów) można wyjaśnić zwiększonym usuwaniem bakterii, być może z powodu zachowania wybuchu utleniającego neutrofili, jak u szczurów CLP traktowanych a C5a (4). Jest również możliwe, że indukowana sepsą regulacja w górę C5aR w narządach czyni te narządy wrażliwymi na szkodliwe działanie po kontakcie z C5a, chociaż należy to wykazać. Biologiczne znaczenie zwiększonej ekspresji C5aR w różnych narządach podczas sepsy pozostaje jeszcze nieokreślone. Można zauważyć, że w CLP u szczurów wątroba, płuca i nerki stają się celami rozwoju niewydolności wielonarządowej, a przechwytywanie C5a z C5a znacznie poprawia przeżycie i dramatycznie zmniejsza intensywność niewydolności wielonarządowej (1, 4). Niedawno odkryliśmy, że ekspresja C5aR po CLP jest zwiększona w grasicy szczura i jest skorelowana ze zwiększonym wiązaniem C5a i indukcją apoptozy (34). Wyniki obecnych badań wskazują, że ekspresja C5aR jest zwiększona w płucach, wątrobie, nerkach i sercu podczas posocznicy wywołanej CLP u myszy na poziomie białka, jak również na poziomie transkrypcji. Nasze wyniki podkreślają znaczenie zwiększonej ekspresji C5aR podczas sepsy poprzez wykazanie znacząco ulepszonego przeżycia u myszy CLP po blokadzie C5aR lub z A5a. Funkcjonalne znaczenie zwiększonej ekspresji C5aR w różnych narządach podczas sepsy pozostaje do ustalenia. Nasze wyniki sugerują, że dalsze badania związków, które przechwytują C5a lub zakłócają jego zdolność do wiązania się z C5aR, są uzasadnione. Podziękowania Niniejszy dokument został wsparty przez następujące stypendia National Heart, Lung i Blood Instytutu NIH: GM-29507, HL-31963, GM-61656 i GM-62134. Przypisy Konflikt interesów: nie zadeklarowano konfliktu interesów. Zastosowano niestandardowe skróty: receptor C5a (C5aR); podwiązanie / przebicie w kale (CLP); anty-C5aR (a C5aR); Sól buforowana fosforanem Dulbecco (DPBS); Antagonista C5aR (C5aRa); Znakowany 125I anty-mysz C5aR IgG (125I-aC5aR).
[więcej w: artur szudrowicz, brwi makijaż permanentny, benzoesan sodu szkodliwość ]
[więcej w: szczepionki na pneumokoki, benzoesan sodu szkodliwość, paznokcie w dwóch kolorach ]