Ścieżka MEKK1-JNK odgrywa rolę ochronną w przeciążeniu ciśnieniowym, ale nie pośredniczy w przeroście mięśnia sercowego

Kinaza kinazy białkowej aktywowana mitogenem (MEKK1) pośredniczy w aktywacji kinazy końca C-Jun NH2 (JNK). Chociaż wcześniejsze badania z użyciem hodowanych miocytów sercowych sugerowały, że szlak MEKK1-JNK odgrywa kluczową rolę w przeroście i apoptozie, jego działanie w przeroście serca i apoptozie nie jest w pełni zrozumiałe u dorosłych zwierząt in vivo. Zbadaliśmy rolę szlaku MEKK1-JNK w przeciążonych ciśnieniowo sercach za pomocą myszy z niedoborem MEKK1. Stwierdziliśmy, że poprzeczne pasmo aorty znacznie zwiększa aktywność JNK w Mekk1 + / +, ale nie Mekk1. /. myszy, co wskazuje, że MEKK1 pośredniczy w aktywacji JNK przez przeciążenie ciśnieniowe. Niemniej jednak przeciążenie ciśnieniem powodowało znaczny poziom przerostu serca i ekspresję przedsionkowego czynnika natriuretycznego w Mekk1. /. zwierząt, które wykazały wyższą śmiertelność i stosunek masy płuc / ciała niż obserwowano w grupie kontrolnej. Czternaście dni po bandowaniu, Mekk1. /. serca były rozszerzone, a ich frakcja wyrzutowa lewej komory była niska. Przeciążenie ciśnieniem powodowało podwyższony poziom apoptozy i zmian zapalnych u tych myszy i powodowało mniejszy wzrost TGF-a. i TNF-a ekspresji niż w przypadku kontroli typu dzikiego. Tak więc wydaje się, że MEKK1 jest wymagany do aktywacji przez przeciążenie ciśnieniowe. Indukowanej JNK i podwyższonej regulacji cytokin, ale może być zbędny w przypadku hipertrofii serca wywołanej przeciążeniem ciśnieniowym. MEKK1 zapobiega również apoptozie i stanom zapalnym, chroniąc w ten sposób przed niewydolnością serca i nagłą śmiercią po przeciążeniu serca. Wprowadzenie Szlaki kinazy białkowej aktywowanej mitogenem (MAPK) odgrywają kluczową rolę w pośredniczeniu w rozwoju komórek i apoptozie (1-3). Coraz więcej danych sugeruje, że członkowie rodziny MAPK, w tym regulatorowa kinaza sygnałowa pozakomórkowa (ERK), kinaza terminalna C-Jun NH2 (JNK) i p38-MAPK, odgrywają kluczową rolę w regulowaniu przerostu i apoptozy w miocytach sercowych (4; 5). Spośród składników rodziny MAPK, kinaza kinazy białkowej aktywowanej mitogenem (MEKK1) jest kinazą serynowo-treoninową o wielkości 196 kDa, aktywowaną w odpowiedzi na cytokiny i różne stresy. MEKK1 preferencyjnie aktywuje szlak JNK, a także wpływa na aktywność szlaku ERK, natomiast ma niewielki lub żaden wpływ na szlak p38-MAPK (6. 8). Rola MEKK1 i dalszych JNK w przerostach mięśnia sercowego i apoptozie była badana głównie w hodowanych miocytach sercowych in vitro. Wyniki tych badań wskazują, że JNK ma kluczowe znaczenie w rozwoju przerostu mięśnia sercowego (9. 15). Zgłoszono jednak również pogląd przeciwny (16). Podobnie, zgłaszano sprzeczne wyniki dotyczące roli MEKK1 i JNK w apoptozie miocytów sercowych (4, 17. 19). Niedawno wygenerowano myszy z niedoborem MEKK1 (myszy MEKK1a / P) (20). Te myszy mają wadliwe zamknięcie powieki, proces obejmujący migrację komórek nabłonkowych, ale nie wykazują widocznej nieprawidłowości w sercu w warunkach linii podstawowej. Oczekuje się, że te myszy dostarczą użytecznych informacji dotyczących funkcji szlaku MEKK1-JNK w dorosłym sercu mysiego w warunkach stresu in vivo. Wcześniej wykazaliśmy, że przeciążenie ciśnieniowe powoduje zarówno przerost serca jak i apoptozę w sercu mysim (21, 22). Zbadaliśmy zatem, w jaki sposób selektywna delecja MEKK1 wpływa na hipertrofię serca i apoptozę u dorosłych myszy in vivo. W szczególności określiliśmy (a), czy aktywacja JNK w odpowiedzi na przeciążenie ciśnieniem jest modyfikowana w MEKK1. /. myszy i (b) czy MEKK1. /. czy przerost, przeżycie zwierząt i śmierć komórki w odpowiedzi na przeciążenie ciśnieniowe są zaburzone. myszy. Metody MEKK1. /. myszy. Generacja MEKK1. /. myszy zostały opisane wcześniej (20). Pasemka aorty. Poprzeczną operację aorty lub pozorną operację przeprowadzono w MEKK1. /. myszy i myszy z miotem MEKK1 + / + lub nielittermate myszy C57BL / 6 (MEKK1 + / +). Ponieważ doświadczenia przeprowadzone za pomocą myszy z miotami MEKK1 + / + i nieliteratowymi myszami C57BL / 6 (MEKK1 + / +) wykazały nierozróżnialne wyniki, dane z myszy z miotu i nieliteratowych myszy MEKK1 + / + połączono. Opisano metodę nakładania przeciążenia ciśnieniowego u myszy (21, 22). Myszy znieczulono mieszaniną ketaminy (0,065 mg / g), ksylazyny (0,013 mg / g) i acepromazyny (0,002 mg / g). Myszy wentylowano objętością oddechową 0,2 ml i częstością oddechową 110 oddechów na minutę. Skrzynię otwarto w drugiej przestrzeni międzyżebrowej. Zwężenie aorty wykonano przez podwiązanie poprzecznej aorty piersiowej między tętnicą nienazwaną a lewą tętnicą szyjną wspólną za pomocą igły 28 G za pomocą szwu nylonowego 7-0. Aby zmierzyć ciśnienie tętnicze, użyto dwóch przetworników wysokiej czułości cewnika (1.4F; Millar Instruments Inc., Houston, Texas, USA)
[patrz też: młody jęczmień w proszku, maciej syka, śliwka w czekoladzie kalorie ]
[przypisy: wypadanie płatka zastawki mitralnej, jacek bryndal, klaudia el dursi ]