Leptyna chroni myszy przed atrofią limfatyczną wywołaną głodem i zwiększa komórkę grasicy u myszy ob / ob cd

Świeżo zebrane tymocyty z myszy typu dzikiego przemyto jednokrotnie pożywką hodowlaną (RPMI, 10% FCS) i inkubowano przez noc w 37 ° C w stężeniu 10 x 106 tymocytów w ml pożywki w z 3 warunków: (a) sama pożywka (b) sam deksametazon (c) leptyna (10. 8 M) i deksametazon. Tymocyty hodowano również w 4 ° C jako kontrolę negatywną. Komórki następnie przemyto i natychmiast wybarwiono aneksynami V. FITC (Roche Diagnostics Ltd., East Sussex, Wielka Brytania) w odpowiednich buforach i wybarwiono kontrastowo PI, jak opisano poprzednio (32). Poziomy FL1-H (wybarwione aneksyną VFITC) i FL2-H (wybarwione PI) analizowano na cytometrze przepływowym FACScalibur (systemy immunocytometryczne Becton Dickinson). Analizy statystyczne. Analizy przeprowadzono z zastosowaniem jednoczynnikowej ANOVA z testem post hoc Tukey dla danych o rozkładzie normalnym lub z ANOVA dla Kruskala-Wallisa dla skośnych danych. Wyniki wyrażono jako średnie. SEM; Wartości P mniejsze niż 0,05 uznano za statystycznie istotne. Wyniki Ostry głód doprowadził do nieproporcjonalnego spadku masy limfoidalnej. Wpływ ostrego głodu z i bez egzogennego podawania leptyny na masę ciała, masę narządu i parametry metaboliczne myszy C57BL / 6 typu dzikiego przedstawiono w Tabeli 1. Największy wpływ ostrego głodu miał grasica (Figura 1). . Myszy leczone leptyną podczas okresu głodzenia były całkowicie chronione przed głęboką atrofią grasicy wywołaną 48-godzinnym postem (Figura 1a). Chociaż nie tak dramatyczny jak zmiany obserwowane w grasicy, głodzenie przez 48 godzin również spowodowało znaczne zmniejszenie masy śledziony. Wpływ głodu na zanik śledziony był znacznie bardziej ograniczony, gdy egzogenna leptyna była podawana w okresie głodu (Ryc. 1b). W przeciwieństwie do wpływu leptyny na tkankę limfatyczną, podawanie leptyny podczas postu nie miało wpływu na masę tkanki nielimfanowej (Tabela 1, Figura 1, c i d). Figura Wpływ podawania leptyny podczas głodzenia na tkanki limfoidalne (a, b, e, f) i nielimfanowe (c i d) u myszy C57BL / 6. (a) Waga grasicy, (b) masa śledziony, (c) masa wątroby, (d) masa nerki, (e) subpopulacje tymocytów i (f) subpopulacje śledziony. Wartości reprezentują średnią. SEM. * P <0,05 vs. kontrolne kontrole ad libitum y; ** P <0,05, *** P <0,0001 myszy z zagłodzonym PBS vs. zarówno kontrolne karmione ad libitum a, jak i głodzone myszy leczone leptyną. Tabela Wpływ podawania leptyny podczas ostrego głodu u myszy C57BL / 6 Skutki ostrego głodu na subpopulacjach tymocytów zostały odwrócone przez leptynę. Ostry głód spowodował dramatyczny spadek średniej całkowitej liczby tymocytów do 13% obserwowanej u myszy kontrolnych (Tabela 1). To zmniejszenie całkowitej komórkowej komórki grasiczej znalazło odzwierciedlenie w zmniejszeniu liczby bezwzględnej wszystkich badanych podzbiorów komórek tłuszczowych (ryc. 1e). Największy wpływ na czczo zaobserwowano w subpopulacji tymocytów podwójnie dodatnich CD4 + CD8 +. Głodzenie powodowało zmniejszenie zarówno bezwzględnej liczby komórek (Figura 1e), jak i ogólnej względnej proporcji tymocytów CD4 + CD8 + (66,0. 1,26%) w porównaniu z obserwowanymi u myszy karmionych ad libitum (76,2. 1,32%, P <0,001). . Chociaż ostry głód spowodował względny wzrost ogólnego odsetka pojedynczego dodatniego CD4 + CD8. tymocyty (17,0. 0,7% [na czczo, PBS] vs. 11,1. 0,69% [karmione], P <0,005), nadal było znaczące zmniejszenie bezwzględnej liczby CD4 + CD8. tymocyty w grupie z niedoborem traktowanej PBS w porównaniu z kontrolami z podawaniem ad libitum a (1,90. 0,24 [na czczo, PBS] vs. 8,36. 0,61 miliona [karmione]; P <0,0001). Leptyna całkowicie chroniła przed tymi wywołanymi głodem zmianami w obu liczbie tymocytów (Figura 1e) i proporcjach subpopulacji (procentowe liczby tymocytów CD4 + CD8 +: 76,6. 1,92 [na czczo, leptyna] vs. 76,2. 1,32 [pożywka], P = NS; procent CD4 + Cefocytów tymocytów: 10,8. 1,39 [na czczo, leptyna] vs. 11,1. 0,69 [pożywka], P = NS). Względne proporcje CD4a CD8. lub teocyty CD4 + CD8 + nie były znacząco zmienione przez głodzenie lub leczenie leptyną. Leptyna uwolniła limfocyty T śledziony od skutków ostrego głodu. Czterdzieści osiem godzin głodzenia spowodowało 42% zmniejszenie całkowitej liczby splenocytów (Tabela 1, Figura 1f). Bezwzględna liczba splenocytów ujemnych zarówno dla komórek CD4, jak i CD8 (nie komórek T3) została szczególnie zmniejszona w wyniku ostrego głodu (7,53. 1,31 [szybko, PBS] vs. 21,5. 2,46 milionów [pożywka]), chociaż leptyna była w stanie jedynie częściowo zapobiegają indukowanym postom zmianom w tej subpopulacji (15,1. 2,36 mln [szybko, leptynie]). Największy wpływ leptyny zaobserwowano w subpopulacji śledziony limfocytów T CD4 + [patrz też: olej z konopii indyjskiej, osłabienie organizmu przyczyny, klaudia el dursi ] [hasła pokrewne: jacek bryndal, klaudia el dursi, 5lo bydgoszcz ]