Matrix – zależne od metaloproteinazy-7 Uwalnianie czynnika martwicy nowotworu w modelu przepukliny dyski przepuklinowej

Przepuklina dysku (HD), jedna z głównych przyczyn bólu krzyża, często ustępuje samoistnie bez interwencji chirurgicznej. Resorpcja jest związana z wyraźnym wzrostem naciekających makrofagów, a metaloproteinazy macierzy (MMP) MMP-3 i MMP-7 są zaangażowane w to zjawisko. Opracowaliśmy mysi model hodowli narządów, w którym nienaruszone krążki międzykręgowe hodowano wspólnie z makrofagami otrzewnowymi w celu zbadania roli MMP w resorpcji HD. Stosując makrofagi izolowane z myszy pozbawionych MMP, donoszono, że MMP-7 wytworzony z makrofagów był wymagany do degradacji proteoglikanów, utraty masy mokrej i naciekania makrofagów współhodowanych krążków. Niezdolność makrofagów z niedoborem MMP-7. do infiltracji krążków nie może być przypisana defektowi migracji makrofagów. MMP-7 była wymagana do uwolnienia cytokiny TNF-a. z makrofagów otrzewnowych. Wytwarzanie rozpuszczalnego TNF-a był niezbędny do indukcji MMP-3 w hodowlach dysków, co z kolei jest wymagane do wytworzenia chemotaktycznego makrofaga i następującej po nim infiltracji makrofagów. TNF-. uwalnianie z makrofagów było konieczne, ale niewystarczające do resorpcji krążka, co wymagało infiltracji makrofagów. Wnioskujemy, że istnieje rozległa komunikacja między makrofagami i chondrocytami w resorpcji HD oraz że zasadniczym elementem tej komunikacji jest wymóg uwalniania rozpuszczalnych czynników bioaktywnych przez MMP. Wprowadzenie Ból krzyża (LBP) dotyka od 60 do 80% Amerykanów w ich życiu (1). Przepuklina dysku (HD), występowanie zdegenerowanego krążka w kanale kręgowym lub nerwowa foramina, polegająca na uciskaniu tkanek nerwowych (2), odpowiada za objawy u do 40% wszystkich pacjentów z LBP (1). Chociaż stan ten powoduje prawie 280 000 operacji w USA każdego roku (3), około połowa pacjentów z bólem pleców w ciągu 6 tygodni samoistnie ustępuje (4). Analiza obrazowania metodą rezonansu magnetycznego (MRI) u pacjentów HD wykazała, że wyraźny i postępujący spadek wielkości HD występował najczęściej w HD, które były w znacznym stopniu narażone na przestrzeń nadtwardówkową (5) i korelowały z obfitą waskularyzacją, określoną przez nagromadzenie środek kontrastowy kwas gadolinowo-dietylenotriaminopentaoctowy (GD-DTPA) (6). Krążek międzykręgowy, który jest zwykle karmiony jedynie przez dyfuzję z kręgów, zostaje unaczyniony po ekspozycji na kanał kręgowy, a próbki chirurgiczne od pacjentów z ziarninową ekspozycją HD z widocznym makrofagiem i łagodną infiltracją limfocytów T, których nie obserwuje się w zdrowych kręgach międzykręgowych. dysk (7). Tak więc wydaje się, że naturalna resorpcja HD zachodzi w procesie zależnym od unaczynienia i koreluje z widoczną infiltracją makrofagów. Metaloproteinazy macierzy zewnątrzkomórkowej (MMP) należą do rodziny metzincyn zależnych od cynku proteaz i wiadomo, że rozkładają one różne składniki macierzy zewnątrzkomórkowej (ECM). MMP-3 (stromelizyna-1, EC 3.4.24.17) i MMP-7 (matrilysin, EC 3.4.24.23) mogą w szczególności rozkładać proteoglikany chrząstki, takie jak agrekan (8, 9). Obie te MMP są silnie eksprymowane w ludzkich próbkach chirurgicznych HD, podczas gdy normalnie pojawiające się dyski nie mają istotnej ekspresji tych MMP (10. 12). Dlatego postawiliśmy hipotezę, że te MMP ulegają zwiększeniu, gdy infiltrujące makrofagi napotykają chondrocyty w krążku międzykręgowym i są odpowiedzialne za resorpcję HD. Podaliśmy informację o rozwoju systemu hodowli chondrocytów i makrofagów w celu zbadania roli MMP w procesie resorpcji (13). Wykazaliśmy, że dodanie makrofagów do kultur dyskowych spowodowało wyraźną regulację w górę MMP-3 w chondrocytach tarczowych, wytworzenie chemotaktycznego makrofaga i resorpcję krążka, co wykazano przez utratę wagi mokrej (13). Stosując dyski wyizolowane z myszy pozbawionych MMP, ustaliliśmy, że wytwarzanie MMP-3 przez chondrocyty było wymagane do infiltracji makrofagów i resorpcji krążka. Obecne badanie bada rolę makrofagów MMP-3 i MMP-7 w procesie resorpcji HD przy użyciu modelu kokultury. Nieoczekiwanie okazało się, że wytwarzanie MMP-7 przez makrofagi jest wymagane do infiltracji makrofagów do tkanki krążka poprzez mechanizm obejmujący uwalnianie rozpuszczalnego TNF-a. Metody Protokoły eksperymentalne zostały zatwierdzone przez Instytucjonalny Komitet ds. Pielęgnacji i Użytkowania Zwierząt, Vanderbilt University Medical Center. Myszy. W tych badaniach stosowano homozygotyczne myszy 129 (129 / Sv, MMP-3a zerowe 129SvEv i myszy 129SvEv pozbawione MMP-7a. Mull-Mull-null i myszy pozbawione MMP-7a były generowane przez rekombinację homologiczną w embrionalnych komórkach macierzystych, jak opisano (14, 15). Mikro-kultury z udziałem komórek / makrofagów
[hasła pokrewne: pogotowie stomatologiczne kielce, młody jęczmień w proszku, olej kokosowy na zmarszczki ]
[przypisy: wypadanie płatka zastawki, duduk, empress ]