Systemowo wyprowadzone komórki jelita grubego CD4 + Th2 odgrywają centralną rolę w alergicznej biegunki z udziałem STAT6 czesc 4

Jednak grupa kontrolna nie wykazała wzrostu komórek tucznych. Strzałki wskazują na eozynofile. Oryginalne powiększenie, × 200. 400. Eozynofile i komórki tuczne dramatycznie infiltrowały jelita grubego, ale nie jelito cienkie myszy z biegunką. Barwienie H & E przeprowadzono w celu zbadania zmian histopatologicznych w małych i dużych jelitach myszy z biegunką. Co ciekawe, eozynofile infiltrowały tylko duże jelita myszy z biegunką, a tylko nabłonek i obszar krypty jelita grubego, a nie blaszka właściwa i podśluzówkowa (Figura 1b). Jak pokazano na Figurze 1c, liczba infiltrujących komórek tucznych była większa w jelicie grubym u myszy wywołanych biegunką (Figura 1c, po prawej) niż u myszy kontrolnych (Figura 1c, po lewej). Ponadto zwiększoną liczbę komórek tucznych obserwowano wyłącznie w jelicie grubym. Nie obserwowano owrzodzeń błony śluzowej i przerostu komórek nabłonka w małych lub dużych jelitach myszy indukowanych biegunką (dane nie pokazane). Selektywna indukcja szybkich odpowiedzi komórek B specyficznych dla Ag w jelicie grubym myszy indukowanych biegunką. Oszacowane poziomy całkowitych i swoistych dla OVA przeciwciał IgE wykryto w surowicy u myszy wywołanych biegunką, podczas gdy myszy kontrolne, które nie wykazywały żadnego znaku biegunki wykazywały albo niskie albo niewykrywalne poziomy całkowitych i swoistych dla OVA przeciwciał IgE Ig ( Figura 2a). Gdy badano częstotliwość AFC IgE, komórki produkujące IgE były znacznie liczniejsze w jelicie grubym myszy indukowanych biegunką niż myszy kontrolnych bez biegunki (Figura 2a). Ponadto należy zauważyć, że liczba IgE AFC nie zwiększyła się w jelicie cienkim myszy z biegunką (Figura 2a). Rycina 2 Selektywna indukcja szybkich odpowiedzi komórek B w jelicie grubym myszy z biegunką. (a) Całkowite i specyficzne dla OVA przeciwciała IgE IgE w surowicy i całkowite AFC IgE w jelicie cienkim i grubym. W celu oceny liczby komórek barwiących dodatnio IgE IgE w jelicie grubym, dziesięć losowo wybranych pól zliczono poniżej x 200. (b) Reprezentuje specyficzne dla OVA AFC IgG i IgA w śledzionie oraz w jelicie cienkim i grubym. Wstawka pokazuje częstotliwość specyficznych dla OVA podklas IgG AFC w dużych jelitach myszy z biegunką. Jednojądrzaste komórki wyizolowano ze śledziony oraz małych i dużych jelit kontrolnych (otwarte słupki) i myszy indukowanych biegunką (wypełnione słupki). Dane te są reprezentatywne dla trzech niezależnych eksperymentów zawierających od 5 do 7 myszy w każdej grupie. AP <0,05, BP <0,01 względem myszy kontrolnych. ND, niewykrywalny. Gdy wykazano, że duża liczba komórek wytwarzających IgE była obecna w jelicie grubym myszy indukowanych biegunką, następnie próbowaliśmy ustalić, czy odpowiedzi IgG i IgA zostały podobnie wzmocnione. Co znamienne, wykryto dużą liczbę specyficznych dla OVA IgG i IgA AFC w jelicie grubym u myszy wywołanych biegunką, podczas gdy nie wykryto specyficznych dla OVA IgG i IgA AFC w jelicie cienkim (Figura 2b). Dodatkowo oceniano również AFC dla podklas IgG specyficznych względem OVA i stwierdzono, że IgG1 jest najliczniejszą podklasą IgG w jelicie grubym myszy z biegunką (Figura 2b, wkładka). Podsumowując, te wyniki uzyskane przez analizę odpowiedzi komórek B w jelicie grubym myszy indukowanych biegunką mogą odzwierciedlać indukcję zlokalizowanych dominujących odpowiedzi typu Th2. Dominujące odpowiedzi cytokinowe typu Th2 selektywnie indukowano w jelicie grubym myszy indukowanych biegunką. Duże limfocyty jelitowe myszy z biegunką wywołały znaczącą IL-4, IL-5 i IL-13, ale niewiele lub brak IFN-y. syntezy po ponownej stymulacji za pomocą OVA in vitro, podczas gdy limfocyty jelitowe nie wytwarzały wykrywalnych poziomów cytokin indukowanych przez Ag (Figura 3a). Przeciwnie, limfocyty śledziony wyizolowane z myszy wywołanych biegunką wytwarzały wysokie poziomy IL-4, IL-5 i IL-13, jak również IFN-y. (Figura 3a). Wyniki te wyraźnie sugerują, że odpowiedzi cytokin typu Th2 są kluczowe dla rozwoju komórek wytwarzających IgE, IgA i IgG1 w jelicie grubym myszy z biegunką. W celu dalszego wyjaśnienia roli dużego jelita CD4 +. Limfocyty T w rozwoju biegunki, następnie zbadaliśmy profil typu Th1 (IFN-a) i typu Th2 (IL-4 i IL-13) syntezy cytokin przez te podzbiory komórek, stosując ilościową RT-PCR swoistą dla cytokin. . Duże jelitowe CD4 +. Frakcja komórek T myszy indukowanych biegunką posiadała wyższe poziomy IL-4 i IL-13 niż u myszy kontrolnych (Figura 3b). Te wyniki sugerują, że CD4 +. Komórki T jelita grubego są głównie zaangażowane w generowanie preferencyjnych odpowiedzi typu Th2 związanych z alergiczną biegunką. Rycina 3 Włączenie dominującej odpowiedzi cytokin Th2 przez limfocyty jelitowe z myszy z biegunką indukowaną OVA [więcej w: przechowywanie kosmetyków, trojanek, olejowanie włosów kręconych ] [więcej w: marcin wójcik żona, warsaw shore odcinek 3 kinomaniak, marcin nikrant ]