Receptor 1 hormonu koncentrującego melaninę, nowy cel odpowiedzi autoprzeciwciał w bielactwie ad 6

Przeciwnie, na wiązanie Ab do receptora nie miała wpływu preinkubacja próbek z bielactwa nabłonka z błonami komórkowymi CHO: nie było znaczącej różnicy między indeksami Ab (Figura 4) mierzonymi z i bez preinkubacji (P = 0,949). Wyniki sugerują, że reaktywność Ab w surowicy pacjenta z bielactwem była specyficznie absorbowana przez ekspresję MCHR1 w błonach komórkowych CHO. Rysunek 4 Eksperymenty adsorpcji. Surowice surowice MCHR1 Ab-dodatnie (n = 3) i pula zdrowych surowic kontrolnych (n = 6) wstępnie przedsorbowano membranami komórkowymi CHO lub CHO-MCHR1 przed analizą w badaniu radiobiałania. Wyniki dwóch eksperymentów przedstawiono jako średni indeks Ab i SD. Read more „Receptor 1 hormonu koncentrującego melaninę, nowy cel odpowiedzi autoprzeciwciał w bielactwie ad 6”

Receptor 1 hormonu koncentrującego melaninę, nowy cel odpowiedzi autoprzeciwciał w bielactwie ad 5

Produkty amplifikacji PCR zostały oczyszczone i zsekwencjonowane w celu ułatwienia identyfikacji cDNA poprzez przeszukiwanie BLAST w międzynarodowych bazach danych. MCHR1 był kodowany przez jeden z cDNA odzyskanych w procesie biopanningu. CDNA MCHR1 następnie sklonowano do pcDNA3. Translacja in vitro i immunoreaktywność MCHR1. Plazmid pcMCHR1 został przetłumaczony in vitro. Read more „Receptor 1 hormonu koncentrującego melaninę, nowy cel odpowiedzi autoprzeciwciał w bielactwie ad 5”

Receptor 1 hormonu koncentrującego melaninę, nowy cel odpowiedzi autoprzeciwciał w bielactwie czesc 4

Górny poziom normy dla testu obliczono stosując średni wskaźnik Ab plus 3 SD dla populacji 28 zdrowych osób. Każda surowica ze wskaźnikiem Ab powyżej górnego poziomu normy została oznaczona jako pozytywna dla reaktywności Ab. Częstotliwość AB Abs MCHR1 została porównana pomiędzy grupami pacjentów i kontrolami przy użyciu dokładnego testu Fishera dla tabel kontyngencji 2 × 2. Wartości P mniejsze niż 0,05 (dwustronne) uznano za istotne. W celu analizy immunoprecypitowanych białek metodą SDS-PAGE i autoradiografii, kompleksy białkowe G. Read more „Receptor 1 hormonu koncentrującego melaninę, nowy cel odpowiedzi autoprzeciwciał w bielactwie czesc 4”

Receptor 1 hormonu koncentrującego melaninę, nowy cel odpowiedzi autoprzeciwciał w bielactwie cd

Kompleksy perełek IgG przemyto intensywnie PBS / 0,05% Tween 20 w celu usunięcia niezwiązanego faga. Związany fag wyeluowano z kompleksów perełek IgG z 150 ul 100 mM HCl (doprowadzono do pH 2,2 stałą glicyną) i kulki magnetycznie oddzielono od supernatantu, który zobojętniono 9 | il 2 M Tris-HCl (pH 7,6). Zawiesinę faga stosowano następnie do infekowania 2 ml eksponencjalnie rosnącej E. coli XL1-Blue (Stratagene) przez 15 minut w temperaturze pokojowej. Porcje zakażonych komórek wysiewano następnie na pożywkę selekcyjną, aby umożliwić odzyskanie fagemidu pJuFo. Read more „Receptor 1 hormonu koncentrującego melaninę, nowy cel odpowiedzi autoprzeciwciał w bielactwie cd”

Receptor 1 hormonu koncentrującego melaninę, nowy cel odpowiedzi autoprzeciwciał w bielactwie ad

Wszystkie surowice trzymano zamrożone w temperaturze około 20 ° C. Badanie to zostało zatwierdzone przez Komisję Etyki w Północnym Szpitalu Ogólnym (Sheffield, Wielka Brytania), a wszyscy badani wyrazili świadomą zgodę. Specyficzne antysurowice. Królicze poliklonalne przeciwciało skierowane przeciw receptorowi receptora melatoniny (anty-MCHR1), MCHR11-S, zakupiono od Alpha Diagnostic International Inc. (San Antonio, Texas, USA). Read more „Receptor 1 hormonu koncentrującego melaninę, nowy cel odpowiedzi autoprzeciwciał w bielactwie ad”

Receptor 1 hormonu koncentrującego melaninę, nowy cel odpowiedzi autoprzeciwciał w bielactwie

Bielactwo jest pospolitym zaburzeniem depigmentacyjnym wynikającym z utraty melanocytów w skórze. Patogeneza choroby pozostaje niejasna, chociaż uważa się, że bierze się pod uwagę mechanizmy autoimmunologiczne. Rzeczywiście, u niektórych pacjentów z bielactwem opisywano autoprzeciwciała i autoreaktywne limfocyty T skierowane na melanocyty. Celem tego badania było zidentyfikowanie antygenów komórek barwnikowych rozpoznawanych przez autoprzeciwciała w bielactwa nabytego. Stosując IgG u pacjentów z bielactwem do przeszukiwania biblioteki fagowej cDNA melanocytów zidentyfikowaliśmy receptor hormonu koncentrującego melaninę (MCHR1) jako nowy autoantygen powiązany z tym zaburzeniem. Read more „Receptor 1 hormonu koncentrującego melaninę, nowy cel odpowiedzi autoprzeciwciał w bielactwie”

Ścieżka MEKK1-JNK odgrywa rolę ochronną w przeciążeniu ciśnieniowym, ale nie pośredniczy w przeroście mięśnia sercowego ad 7

Ponieważ zarówno zapalenie, jak i śmierć komórki, w tym apoptoza są ściśle zaangażowane w rozwój zastoinowej niewydolności serca, spekulujemy, że zwiększona odpowiedź zapalna i apoptoza komórek mięśnia sercowego mogą ułatwiać przejście od kompensowanego hipertrofii LV do zdekompensowanej w MEKK1. /. myszy. Fakt, że zarówno stan zapalny, jak i śmierć komórki są zwiększone przez przeciążenie ciśnieniem, ale nie przez pozorowaną operację w MEKK1. /. Read more „Ścieżka MEKK1-JNK odgrywa rolę ochronną w przeciążeniu ciśnieniowym, ale nie pośredniczy w przeroście mięśnia sercowego ad 7”

Ścieżka MEKK1-JNK odgrywa rolę ochronną w przeciążeniu ciśnieniowym, ale nie pośredniczy w przeroście mięśnia sercowego ad 6

MEKK1 + / + (kontrola) i MEKK1. /. myszy poddano opaskowaniu aorty przez 7 dni. Barwienie DAPI (a i b) i barwienie TUNEL (cid) w mięśniu LV 7 dni po opaskowaniu aorty. Białe strzałki wskazują jądra miocytów TUNEL-dodatnich u myszy kontrolnych (a i c) oraz w MEKK1. Read more „Ścieżka MEKK1-JNK odgrywa rolę ochronną w przeciążeniu ciśnieniowym, ale nie pośredniczy w przeroście mięśnia sercowego ad 6”

Ścieżka MEKK1-JNK odgrywa rolę ochronną w przeciążeniu ciśnieniowym, ale nie pośredniczy w przeroście mięśnia sercowego ad 5

Masa płuc / ciała w MEKK1. /. myszy poddane zespołowi aorty mogą być niedoszacowane, ponieważ nie mogliśmy uzyskać masy płuc / ciała zwierząt, które zmarły przed upływem 14 dni od zespolenia aorty. Przeciążenie nacisku w MEKK1. /. Read more „Ścieżka MEKK1-JNK odgrywa rolę ochronną w przeciążeniu ciśnieniowym, ale nie pośredniczy w przeroście mięśnia sercowego ad 5”

Ścieżka MEKK1-JNK odgrywa rolę ochronną w przeciążeniu ciśnieniowym, ale nie pośredniczy w przeroście mięśnia sercowego czesc 4

Podwójne próbki poddano analizie immunoblot z użyciem przeciwciała anty-JNK1. W b, średnia z fosfo-p46-JNKs / całkowitego JNK1 u myszy kontrolnych z pozorowaną operacją jest wyrażana jako w każdej grupie. * P <0,05, ** P <0,001 w porównaniu do kontroli pozornej w każdej grupie. (c) Zwierzęta uśmiercano w 7 dni. Aktywność ERK i p38-MAPK oceniano przez immunoblotting z przeciwciałem anty-fosfospecyficznym. Read more „Ścieżka MEKK1-JNK odgrywa rolę ochronną w przeciążeniu ciśnieniowym, ale nie pośredniczy w przeroście mięśnia sercowego czesc 4”