Systemowo wyprowadzone komórki jelita grubego CD4 + Th2 odgrywają centralną rolę w alergicznej biegunki z udziałem STAT6 cd

W celu wykrycia specyficznych dla OVA komórek tworzących Ab (AFC) w śledzionie, jak również w jelicie cienkim i grubym, jak opisano wcześniej, przyjęto enzymatyczny test immunosorpcyjny (ELISPOT) (19). Analiza cytokin. Poziomy cytokin (w tym IFN-a, IL-4 i IL-5) supernatantów hodowli stymulowanych przez Ag jednojądrzastych komórek wyizolowanych ze śledziony oraz z jelita cienkiego i grubego zmierzono za pomocą testu ELISA, jak opisano wcześniej (20). Do testu IL-13 zestaw ELISA zakupiono od R & D Systems Inc. (Minneapolis, Minnesota, USA). Read more „Systemowo wyprowadzone komórki jelita grubego CD4 + Th2 odgrywają centralną rolę w alergicznej biegunki z udziałem STAT6 cd”

Systemowo wyprowadzone komórki jelita grubego CD4 + Th2 odgrywają centralną rolę w alergicznej biegunki z udziałem STAT6 ad

Bez względu na to, czy prowokowano raz lub dwukrotnie, u myszy otrzymujących 50 mg lub 100 mg doustnej OVA wystąpiła biegunka. Dlatego w tym badaniu wybraliśmy protokół jednej dawki podskórnego primingu z mg OVA przed karmieniem doustnym 50 mg OVA. W celu kontroli myszy wielokrotnie podawano 50 mg OVA w PBS przez intubację żołądka bez żadnego ogólnoustrojowego testu prowokacji. Dwie godziny po ostatnim podaniu doustnym myszy uśmiercono i analizowano reakcje alergiczne wywołane przez Ag. Leczenie mAb anty-IL-4. Read more „Systemowo wyprowadzone komórki jelita grubego CD4 + Th2 odgrywają centralną rolę w alergicznej biegunki z udziałem STAT6 ad”

Systemowo wyprowadzone komórki jelita grubego CD4 + Th2 odgrywają centralną rolę w alergicznej biegunki z udziałem STAT6

Systemalnie zagruntowane myszy BALB / c rozwinęły ciężką biegunkę po wielokrotnym doustnym podaniu owoalbuminy (OVA). Analiza histologiczna wykazała, że dramatyczny naciek eozynofilów i komórek tucznych wystąpił w jelicie grubym, ale nie w jelicie cienkim myszy z biegunką. Co ciekawe, CD4 + Limfocyty T jelita grubego wydzielały IL-4 i IL-13 na wysokich poziomach. Identycznie leczone myszy z uszkodzonym genem STAT6 nie rozwinęły wywołanej OVA biegunki. Ponadto, leczenie myszy BALB / c monoklonalnym przeciwciałem anty-IL-4 zapobiegało rozwojowi alergicznej biegunki. Read more „Systemowo wyprowadzone komórki jelita grubego CD4 + Th2 odgrywają centralną rolę w alergicznej biegunki z udziałem STAT6”

Uszkodzony wychwyt kwasów tłuszczowych moduluje reakcję na insulinę i reakcje metaboliczne na dietę u myszy pozbawionych CD36 ad 7

Dane epidemiologiczne wskazują, że dieta zachodnia wiąże się z większą częstością występowania cukrzycy typu 2 (ostatnio omówiona w pozycji 47). Dieta ta charakteryzuje się wysoką zawartością tłuszczów nasyconych i prostych, szybko wchłanianych węglowodanów. Istnieją dowody na poparcie negatywnego wpływu obu składników na reaktywność glukozy na insulinę. Diety o wysokiej zawartości tłuszczu indukują oporność na insulinę obwodową, częściowo poprzez promowanie otyłości (47, 48). Podobnie, diety bogate w cukry proste, takie jak sacharoza lub fruktoza, które są szybko wchłaniane i które mają wysoki indeks glikemiczny, gdy są podawane w dużych ilościach (wysokie obciążenie glikemiczne), promują nietolerancję glukozy i dyslipidemię charakterystyczną dla zespołu metabolicznego X (47). Read more „Uszkodzony wychwyt kwasów tłuszczowych moduluje reakcję na insulinę i reakcje metaboliczne na dietę u myszy pozbawionych CD36 ad 7”

Matrix – zależne od metaloproteinazy-7 Uwalnianie czynnika martwicy nowotworu w modelu przepukliny dyski przepuklinowej ad

System współrodkowy krążka międzykręgowego / otrzewnej makrofagów został opisany wcześniej (13). Pokrótce, aktywowane mysie makrofagi otrzymano przez dootrzewnowe podawanie 3% pożywki tioglikolanowej (Difco Laboratories, Detroit, Michigan, USA). W przypadku niektórych eksperymentów, czerwone fluorescencyjne linkery komórkowe (PKH26, Sigma Chemical Co., St Louis, Missouri, USA) wstrzyknięto do otrzewnej 3 dni po podaniu tioglikolanu zgodnie z instrukcjami producenta. Komórki zebrano przez płukanie otrzewnej 4 dni po traktowaniu tioglikolanem. Mózgowe krążki międzykręgowe uzyskano za pomocą mikroskopu po usunięciu skóry i miękkich tkanek. Read more „Matrix – zależne od metaloproteinazy-7 Uwalnianie czynnika martwicy nowotworu w modelu przepukliny dyski przepuklinowej ad”

Matrix – zależne od metaloproteinazy-7 Uwalnianie czynnika martwicy nowotworu w modelu przepukliny dyski przepuklinowej

Przepuklina dysku (HD), jedna z głównych przyczyn bólu krzyża, często ustępuje samoistnie bez interwencji chirurgicznej. Resorpcja jest związana z wyraźnym wzrostem naciekających makrofagów, a metaloproteinazy macierzy (MMP) MMP-3 i MMP-7 są zaangażowane w to zjawisko. Opracowaliśmy mysi model hodowli narządów, w którym nienaruszone krążki międzykręgowe hodowano wspólnie z makrofagami otrzewnowymi w celu zbadania roli MMP w resorpcji HD. Stosując makrofagi izolowane z myszy pozbawionych MMP, donoszono, że MMP-7 wytworzony z makrofagów był wymagany do degradacji proteoglikanów, utraty masy mokrej i naciekania makrofagów współhodowanych krążków. Niezdolność makrofagów z niedoborem MMP-7. Read more „Matrix – zależne od metaloproteinazy-7 Uwalnianie czynnika martwicy nowotworu w modelu przepukliny dyski przepuklinowej”

Systemowo wyprowadzone komórki jelita grubego CD4 + Th2 odgrywają centralną rolę w alergicznej biegunki z udziałem STAT6 ad 7

W tym badaniu okazało się, że specyficzne dla Ag komórki T CD4 + jelita grubego wytwarzają wysokie poziomy IL-4, IL-5 i IL-13, co może przyczyniać się do zlokalizowanej infiltracji, jak również do aktywacji eozynofilów u myszy z OVA-1. indukowana biegunka. Ostatnio zasugerowano, że istnieją zarówno zależne od STAT6 i niezależne mechanizmy eozynofilii wywołanej przez Ag, jak STAT6. /. stwierdzono, że myszy tylko częściowo hamują eozynofile w płukaniu oskrzelowo-pęcherzykowym myszy z nadreaktywnością dróg oddechowych (11). Read more „Systemowo wyprowadzone komórki jelita grubego CD4 + Th2 odgrywają centralną rolę w alergicznej biegunki z udziałem STAT6 ad 7”

Systemowo wyprowadzone komórki jelita grubego CD4 + Th2 odgrywają centralną rolę w alergicznej biegunki z udziałem STAT6 ad 6

W przeciwieństwie do cytokin typu Th2, intensywność IFN-y wiadomość była podobna wśród limfocytów wyizolowanych ze śledziony oraz jelita cienkiego i grubego. W przypadku śledziony zaobserwowano podobny układ limfocytów jelita grubego. Charakterystyka IFN- a komórki zawierające IL-4a przez wewnątrzkomórkowe barwienie cytokinami potwierdzały wynik otrzymany w teście RT-PCR i pokazały, że te komórki T CD4 + wytwarzające cytokiny były głównie obecne w jelicie grubym i śledzionie, ale nie w jelicie cienkim (Figura 5d). . Podsumowując, wyniki te wyraźnie wskazują, że komórki T CD4 + śledzione pod względem systemowym selektywnie migrują do jelita grubego i że te systemowe układowe komórki T CD4 + z dużych komórek jelitowych wytwarzają cytokiny typu Th2, które odgrywają kluczową rolę w rozwoju reakcji alergicznych. Read more „Systemowo wyprowadzone komórki jelita grubego CD4 + Th2 odgrywają centralną rolę w alergicznej biegunki z udziałem STAT6 ad 6”

Systemowo wyprowadzone komórki jelita grubego CD4 + Th2 odgrywają centralną rolę w alergicznej biegunki z udziałem STAT6 ad 5

Synteza cytokin przez komórki jednojądrzaste wyizolowane ze śledziony oraz z małych i dużych jelit kontrolnych (otwarte słupki) lub indukowanych przez biegunkę (wypełnione słupki) myszy. Komórki jednojądrzaste hodowano w obecności 100 .g / ml OVA przez 4 dni, a następnie supernatanty hodowli analizowano za pomocą odpowiedniego ELISA specyficznego dla cytokiny. (b) Ekspresja mRNA specyficznego dla cytokiny Th1 (IFN-a) i Th2 (IL-4 i IL-13) przez całe limfocyty i CD4 +. Limfocyty T z jelita grubego kontrolnego (otwarty okrąg) i wywołanego biegunką (zamknięty okrąg) myszy. Ilościowe metody RT-PCR przeprowadzono przy użyciu LightCycler. Read more „Systemowo wyprowadzone komórki jelita grubego CD4 + Th2 odgrywają centralną rolę w alergicznej biegunki z udziałem STAT6 ad 5”

Matrix – zależne od metaloproteinazy-7 Uwalnianie czynnika martwicy nowotworu w modelu przepukliny dyski przepuklinowej ad 7

Wydaje się, że aktywność TACE pozostaje nienaruszona u myszy zerowych MMP-7, ponieważ poziomy sTNF-. są znacznie podwyższone po podaniu LPS in vivo (nasze niepublikowane dane). TACE nie jest wymagane do uwalniania TNF-a pośredniczonego przez MMP-7, ponieważ monocyty z niedoborem TACE uwalniają sTNF-a. w odpowiedzi na rMMP-7 (R. Black, komunikacja osobista). Read more „Matrix – zależne od metaloproteinazy-7 Uwalnianie czynnika martwicy nowotworu w modelu przepukliny dyski przepuklinowej ad 7”